Características del diagnóstico prenatal por hibridación fluorescente in situ en Cuba / Features of the prenatal diagnosis by fluorescence in situ hybridization in Cuba

Introducción: El diagnóstico prenatal mediante la hibridación fluorescente in situ disminuye el tiempo de diagnóstico al no ser necesario el cultivo celular. Objetivo: Describir las características y experiencias del diagnóstico prenatal por hibridación fluorescente in situ en Cuba. Método: En amniocitos in situ se aplicaron sondas CEP y LSI para la detección de aneuploidías de los cromosomas 21,18,13, X y Y y sondas LSI para la detección de deleciones asociadas a síndromes de microdeleción. Resultados: Se remitieron al Centro Nacional de Genética Médica 629 casos de alto riesgo genético. Prevaleció la indicación de alteraciones fetales detectadas por ecografía. En 612 (97 por ciento) casos se obtuvo un diagnóstico satisfactorio, entre ellos, 50 (8,1 por ciento) casos positivos, con predominio del síndrome Down en 26 casos. Se corroboraron por citogenética convencional 312 casos con 98 por ciento de concordancia con los resultados obtenidos por hibridación fluorescente in situ. Se utilizó el líquido amniótico refrigerado para corroborar casos de diagnóstico dudoso obtenido por citogenética y se detectaron 3 fetos con mosaicos cromosómicos, el origen de un cromosoma marcador y la definición del sexo fetal en un caso. Conclusiones: Con la tecnología por hibridación fluorescente in situ el diagnóstico prenatal logra una segura opción de análisis en aquellos casos de embarazos de alto riesgo genético. Debido a limitaciones tecnológicas, la prueba por hibridación fluorescente in situ en células amnióticas en interfase, se ha adaptado a nuestras condiciones, para lograr siempre un diagnóstico seguro con el menor perjuicio posible a la embarazada, el feto y su familia(AU)

Introduction: Prenatal diagnosis by fluorescent in situ hybridization decreases the time of diagnosis not being necessary the cell culture. Objective: To describe the characteristics and experiences of prenatal diagnosis by fluorescent in situ hybridization in Cuba. Method: In in situ amniocytes CEP catheters were applied and LSI for the detection of aneuploidies of the 21,18,13, X and Y chromosomes, and LSI catheters for the detection of deletions associated with microdeletion syndromes. Results: 629 cases of high genetic risk were referred to the National Center of Medical Genetics. There was a prevalence of the indication of fetal abnormalities detected by ultrasound. In 612 (97 percent) cases the diagnosis was achieved in a satisfactory form, among them 50 (8.1 percent) positive cases, with predominance of Down syndrome in 26 cases. There were corroborated 312 cases by conventional cytogenetics with 98 percent of agreement with the results obtained by fluorescent in situ hybridization. It was used the cooled amniotic fluid to corroborate cases of uncertain diagnosis obtained by cytogenetics and there were detected 3 fetuses with chromosomal mosaics, the origin of a marker chromosome and the definition of fetal sex in one case. Conclusions: With the technology by fluorescent in situ hybridization, the prenatal diagnosis achieved a safe analysis option in cases of genetic high-risk pregnancies. Due to technological limitations, the test by fluorescent in situ hybridization in amniotic cells in interphase has adapted to the conditions in order to always achieve a safe diagnosis with the less possible damage to the pregnant women, the fetus and its family(AU)

Mosaicismo diploide/tetraploide en fibroblastos. Presentación de un caso / Diploid/tetraploid mosaicism in fibroblasts. A case presentation

Las poliploidías como aberración cromosómica han sido estudiadas como una condición concerniente únicamente al reino vegetal; sin embargo, en los humanos eran consideradas como condición letal. Las más frecuentemente detectadas son las triploidías y tetraploidías completas, además de mixoploides diploide/triploide y diploide/tetraploide. Con el objetivo de contribuir al diagnóstico de los mosaicismos pigmentarios, presentamos un caso en el que fue confirmado un mosaicismo 2n/4n en fibroblastos mediante estudio citogenético. Se trata de un paciente masculino de 12 años de edad, remitido a la consulta de genética del Instituto de Endocrinología por presentar debilidad muscular y trastornos neurovegetativos. Al examen físico se observó discreta asimetría con un hipocrecimiento del hemicuerpo derecho, ligera ptosis palpebral y zonas hiperpigmentadas en forma de parches en piel, sobre todo a nivel del tórax. Fue evaluado por especialistas en neurología y dermatología. Se realizó estudio cromosómico en sangre, se realizaron biopsias de piel para realizar estudios anatomopatológicos y citogenéticos. En las zonas hiperpigmentadas se observó: hiperqueratosis, hiperpigmentación irregular de la capa basal de la epidermis, escasa incontinencia pigmentaria. El estudio cromosómico en fibroblastos mostró un mosaicismo diploide/ tetraploide y el estudio en sangre resultó normal, esto contrasta con lo reportado por otros autores cuyo hallazgo de mosaicismo diploide/tetraploide ha sido en sangre, piel y hueso, indistintamente. La observación de asimetría corporal y mosaicismos pigmentarios en piel, debe hacer sospechar la presencia de mixoploidía…(AU)

Reordenamientos cromosómicos estructurales en el diagnóstico citogenético prenatal y postnatal acorde a su origen / Structural chromosomal rearrangements in prenatal and postnatal cytogenetic diagnosis according to their origin

Introducción: según el origen, existen diferentes tipos de reordenamientos cromosómicos estructurales tales como: heredados, de novo y desconocidos; en dependencia de esto será el riesgo en la descendencia y el asesoramiento genético específico a los pacientes y a sus familiares.Objetivo: describir los diferentes reordenamientos cromosómicos estructurales, detectados según su origen.Métodos: se utilizó la información necesaria contenida en los registros de los laboratorios de Citogenética de los Centros de Genética Médica Nacional y Provincial de La Habana. Se confeccionó una base de datos en Excel. Se identificaron 249 portadores de reordenamientos cromosómicos estructurales de 23 403 casos diagnosticados. Se identificó el origen de los mismos con datos de los registros, basados en la extensión de estudios citogenéticos indicados a padres o familiares que permitieran acreditarlo.Resultados: el origen de causa desconocida fue el de mayor frecuencia para 48,2 por ciento; predominaron en estudios postnatales con 82,5 por ciento. Las heredadas con un 43,0 por ciento, prevalecieron en estudios prenatales (58,0 por ciento); las de origen materno en el 56,0 por ciento. Las heredadas maternas fueron mayores en las inserciones, con valor de 100,0 por ciento, mientras que el origen paterno predominó en las inversiones con valores de 90,0 por ciento. Conclusiones: el origen de causa desconocida predominó en estudios postnatales, mientras que en los prenatales prevalecieron las de origen heredado. Las heredadas maternas fueron mayoritarias. Es necesario como una estrategia de prevención, incrementar la detección del origen de los RCE en los portadores, así como la extensión del estudio a los miembros de la familia de portadores

Aplicación de una estrategia en el diagnóstico prenatal del mosaicismo cromosómico para la eliminación de falsos positivos / Application of a prenatal strategy for the diagnosis of chromosomal mosaicism for the elimination of false positives

El mosaicismo cromosómico es un evento con una frecuencia entre el 0,10-0,30 por ciento en el diagnóstico prenatal citogenético por cultivo de amniocitos. Constituye una de las limitantes de este tipo de diagnóstico prenatal debido a que existen eventos confusores que pueden entorpecer la absoluta seguridad en el resultado final. Se propuso una estrategia para eliminar falsos positivos en el diagnóstico de aquellos casos con sospecha de mosaicismo cromosómico, tomando en cuenta el análisis realizado en 16 950 casos del laboratorio de citogenética del Centro Nacional de Genética Médica y los reportes de la literatura internacional. Se compararon dos periodos de trabajo del mismo laboratorio (1984-1999 y 2003-2007). Se demostró el aumento de la eficacia del diagnóstico, en aquel periodo en que fue aplicada la estrategia, por eliminación de casos falsos-positivos debido a pseudomosaicos de aberraciones estructurales principalmente. Los resultados de este estudio permiten recomendar la generalización de esta estrategia a los restantes laboratorios de citogenética del país(AU)

Chromosomal mosaicism is an event having an occurrence from 0,10 percent to 0,30 percent in cytogenetic prenatal diagnosis by amniocytes culture. This is a limiting factor of this type of prenatal diagnosis since there are confounding events that may hinder the absolute confidence in the diagnosis of those cases suspected of chromosomal mosaicism. A total of 16 950 cases of the cytogenetics laboratory of the National Center of Medical Genetics and the reports published in the international literature were analyzed.. Two work periods of the same laboratory were compared (1984 - 1999 and 2003 - 2007). The improvement in diagnosis efficiency in the period when the strategy was applied, mainly due to the elimination of false positive cases of structural aberrations pseudomosaicism, was demonstrated. The results of this study support the recommendation of generalizing this strategy to the rest of the cytogenetics laboratories in the country(AU)

Diagnóstico de translocación en una familia afectada por el Síndrome de Cefalopolisindactilia de Greig / s. t

El Síndrome de Cefalopolisindactilia de Greig fue descrito por primera vez en 1926 por Greig. Es una afección autosómica dominante caracterizada por polidactilia / sindactilia de manos y pies, macrocefalia, hipertelorismo y ocasionalmente anomalías cerebrales y retraso mental. En este trabajo presentamos tres miembros de una familia portadores una translocación aparentemente balanceada y afectados por el síndrome de Cefalopolisindactilia de Greig. El caso índice en nuestro reporte es un feto al que se le realizó estudio cromosómico en líquido amniótico. Se empleó la técnica de cultivo de linfocitos de la madre y el primer hijo para el análisis de la segregación. Las imágenes de los cariotipos fueron obtenidas y procesadas con el empleo del sistema automatizado Cytovision. En el análisis cromosómico fetal se detectó una translocación aparentemente balanceada con intercambio recíproco de los segmentos distales entre brazos cortos de los cromosomas 3 y 7: t (3;7)( p25; p12). En la madre y el primer hijo, ambos afectados por el Síndrome de Cefalopolisindactilia de Greig, se detecta la translocación y los puntos de ruptura fueron idénticos a los encontrados en el cariotipo fetal. De este hallazgo se infiere una alteración en la expresión del gen GLI3, vecino al sitio de ruptura. Al examen físico el recién nacido presentó polidactilia preaxial en ambos pies y frente amplia constatándose el diagnóstico del síndrome familiar. Empleando el método clínico y la historia familiar fue posible establecer el diagnóstico prenatal de la Cefalopolisindactilia de Greig, y estimar el riesgo de alteración fenotípica en un feto con alto riesgo a priori por su historia familiar(AU)

Greig cephalopolysyndactyly syndrome was first described by Greig in 1926. The phenotypic findings include macrocephaly, hypertelorism, pre- and postaxial polydactyly, cutaneous syndactyly, and occasionally mental retardation and nervous system anomalies. Intrafamilial and interfamilial phenotypic variability have been generally observed. The disorder is caused by point mutations or deletions in the GLI3 gene, located on chromosome 7p14,3. Chromosomes were prepared from peripheral blood lymphocytes from the mother and the first son and the amniotic fluid of the fetus. The karyotype were processed using cytovision system software. We report here family with three affected members. The index patient is a fetus. Fetal karyotype analysis revealed a reciprocal translocation t(3;7)(p25;p12) . The mother and the first son, who had both Greig cephalopolysyndactyly syndrome, were found to have identical balanced reciprocal translocation. At birth, a preaxial feet polydactyly and broad forehead, was described, and confirmed the diagnosis of Greig cephalopolysyndactyly syndrome. The genomic complexity that may be associated with apparently simple translocations was totally unexpected. The physical exam, family study and breakpoints characterization are therefore mandatory for risk estimation(AU)